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    • Polysome profiling

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    Polysome profiling 實驗，是利用核糖體沉降系數(shù)較大的特性，用蔗糖密度梯度離心的方法分離多聚核糖體。由于核糖體是細胞里密度最高的生物大分子，一條 mRNA 上結合的核糖體越多，在蔗糖密度梯度離心時的沉降速率越快，因此結合不同數(shù)量核糖體的mRNA 通過離心在溶液中會被分開。離心結束后將蔗糖溶液由底部緩慢抽出，即可對結合有不同數(shù)量核糖體的組分進行分離，可以直觀地反映細胞內(nèi)翻譯的狀態(tài)。




    實驗流程方法


    Polysome profiling 是一種翻譯組學的研究方法，其操作流程為先用放線菌酮或氯霉素處理樣本，然后裂解細胞，離心并取上清液，之后將上清液轉移至蔗糖梯度上進行超離。最后，進行核糖體檢測及分離。研究人員可根據(jù)實驗需要，繼續(xù)做 PCR 定量分析、蛋白質提取等實驗。

     


    Polysome profiling實驗流程概要












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