nba流程推荐_欧冠抽签仪式_英超历届排名_足球非法投注是什么意思 - 预选赛亚洲

  • ·
  • RNA干擾

  • 產品介紹
  • 結果展示
  • FAQ

  • 服務介紹


    針對各類RNA分子,例如mRNA/lncRNA的保守結構域及circRNA的接頭序列進行靶向設計siRNA序列,對于每條選定的siRNA靶序列,設計正義鏈和反義鏈,以loop(9nt or 10nt)相連,構建shRNA質粒直接轉染或通過病毒包裝后轉染細胞,并對轉染細胞進行陽性鑒定和轉代細胞株的培養,最終實現對特定RNA特異性敲低的作用。


    干擾分子類型

    載體名稱

    抗性

    熒光標記

    應用

    瞬轉細胞

    包裝慢病毒

    包裝腺相關AAV病毒

    mRNA/lncRNA/circRNA

    pLV3-U6-shRNA-Negative-Control-CopGFP-Puro

    AmpR/PuroR

    GFP

    ×

    XM02 scAAV.U6.shRNA.CMV.EGFP.WPRE.SV40pA

    AmpR

    GFP

    ×



    技術優勢

     

    1. shRNA載體轉染效率高、操作簡單、RNA沉默效果易于檢測;

    2. 評估挑選特異靶向序列構建載體;



    項目明細

     

    1. 載體構建;

    2. 瞬時轉染;

    3. 特異性引物設計合成;

    4. RT-qPCR驗證;

    5. Sanger測序驗證。



    客戶提供

     

    1. 基因ID/物種/全長序列

    2. 載體名稱



    我們提供

     

    1. shRNA質粒;

    2. 目的載體:10μg質粒+200μL甘油菌;

    3. 對照載體:10μg質粒+200μL甘油菌;

    4. 載體構建與驗證實驗報告:

    ① 載體構建步驟;

    ② 載體測序驗證結果原始文件;

    ③ 細胞轉染實驗步驟;

    ④ qPCR實驗流程方案及產物測序;

    ⑤ 載體構建與驗證實驗報告。




  • 案例1:



    參考文獻:

    Yang R, Chen H, Xing L, Wang B, Hu M, Ou X, Chen H, Deng Y, Liu D, Jiang R, Chen J. Hypoxia-induced circWSB1 promotes breast cancer progression through destabilizing p53 by interacting with USP10. Mol Cancer. 2022 Mar 29;21(1):88. doi: 10.1186/s12943-022-01567-z. PMID: 35351136; PMCID: PMC8961958.




    參考文獻:

    Chen DL, Sheng H, Zhang DS, Jin Y, Zhao BT, Chen N, Song K, Xu RH. The circular RNA circDLG1 promotes gastric cancer progression and anti-PD-1 resistance through the regulation of CXCL12 by sponging miR-141-3p. Mol Cancer.2021 Dec 15;20(1):166. doi: 10.1186/s12943-021-01475-8. PMID: 34911533; PMCID:PMC8672580.







  • 1. circRNA 的沉默(干擾)怎么做?

    基于RNAi技術對基因進行沉默,實驗中一般設計合成靶標基因的siRNA,瞬轉細胞后進行RT-PCR檢測。

    外顯子來源的circRNA因為和mRNA有同樣的外顯子序列,在序列內部設計siRNA靶標無法保證特異性,因此只能針對junction位點處設計靶標序列,前后移動范圍有限,siRNA通常很難設計。EiciRNA或者內含子來源的環形RNA,除了針對junction位點處設計靶標外,也可以嘗試在內含子序列上設計。

     

    2. 設計siRNA為什么不能連續G\C超過3個,連續A\T超過4個?

    因為連續 3個以上的 G 和 C 可以降低雙鏈 RNA 的內在穩定性,從而抑制 RNAi 作用;連續 4個以上的 U 和 A 可能終止由 RNA Polymerase III 介導的轉錄。siRNA 序列中的重復序列或回文結構可能形成發夾狀結構,這種結構的存在可以降低 siRNA 的有效濃度和沉默效率。


如果您對產品或服務有興趣,可通過以下方式聯系我們
在下方表單
填寫需求描述給我們
在線咨詢
工具快速咨詢
撥打免費電話:
400-8989-400
發送郵件至郵箱:
geneseed@geneseed.com.cn
    在線訂購:
    立即購買
    加入購物車(0