ssRNA Cyclase 是一種耐熱連接酶,環狀 RNA 合成試劑盒可催化單鏈DNA(ssDNA)和單鏈RNA(ssRNA)底物的離子分子連接(即環化)。環化反應中,要求催化底物單鏈 DNA/RNA 具有5’-磷酸基團和3’-OH基團。
ssRNA Cyclase 能生產用于滾動圈復制或滾動圈轉錄實驗和下一代測序的單鏈DNA模板以及生產15~500nt環狀RNA。
1、吉賽GSPure?Circular RNA Synthesis Kit試劑盒制備環狀RNA測試
圖1. 使用吉賽GSPure?Circular RNA Synthesis Kit試劑盒制備環狀RNA的效果圖。反應體系為20 μL,長度為307 nt的單鏈RNA的終濃度為1 μM,反應條件為45℃孵育60 min,隨后取樣用6%尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,最終經SYBRTM Gold 核酸染料孵育后熒光成像分析。如圖所示,本試劑盒在60 min內就可以將85% 以上的5’磷酸化3’羥基的單鏈RNA轉化為環狀RNA。
1、本試劑盒可以催化哪些分子進行環化反應?
GSPure?Circular RNA Synthesis Kit是一種耐熱連接酶,可催化單鏈DNA(ssDNA)和單鏈RNA(ssRNA)底物的離子分子連接(即環化),這些底物同時具有5’-單磷酸和3’-羥基。