產(chǎn)品簡(jiǎn)介

T7共轉(zhuǎn)錄加帽RNA合成試劑盒使用T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase）進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄，以含有T7啟動(dòng)子序列的線性雙鏈DNA為模板、NTPs為底物對(duì)啟動(dòng)子下游DNA序列進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，加帽試劑以共轉(zhuǎn)錄方式被摻入mRNA的5'端，使客戶能夠簡(jiǎn)單快速地獲得大量帶有Cap1的RNA產(chǎn)物。Cap1的添加可以保護(hù)mRNA免于降解，從而確保mRNA的翻譯效率。本試劑盒內(nèi)含常用的修飾核苷供轉(zhuǎn)錄需求選擇使用。修飾核苷酸可以有效降低mRNA的免疫原性，抑制先天免疫激活，使mRNA可能成為再生醫(yī)學(xué)、疾病治療和細(xì)胞重編程的有力工具。

本試劑盒一個(gè)反應(yīng)能夠轉(zhuǎn)錄獲得150~200 μg的RNA產(chǎn)物，并可放大生產(chǎn)毫克級(jí)別的RNA。

應(yīng)用場(chǎng)景

轉(zhuǎn)錄合成的RNA可用于RNA結(jié)構(gòu)和功能研究、RNase保護(hù)、探針雜交、anti-sense RNA和 RNAi等應(yīng)用。

運(yùn)輸與保存方法

≤0℃運(yùn)輸；-25℃~-15℃保存。

1、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物產(chǎn)量低或轉(zhuǎn)錄失敗

①可能是模板自身原因，建議重新純化或線性化模板；②重新確認(rèn)模板定量及完整性；③加大模板投入量；

2、產(chǎn)物電泳拖尾現(xiàn)象

①實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程被RNase污染；②DNA模板被RNase污染；

3、RNA產(chǎn)物片段與預(yù)期不符

①質(zhì)粒模板沒(méi)有完全線性化；②RNA存在未完全變性的二級(jí)結(jié)構(gòu)，建議使用變性膠檢測(cè)RNA 產(chǎn)物；③模板GC含量高，可能形成高級(jí)結(jié)構(gòu)；④RNase污染；⑤模板序列中包含類似T7 RNA 聚合酶終止序列，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄提前終止，建議嘗試不同的RNA聚合酶。