以下文章來源于中國科學雜志社 ，作者中國科學生命科學

撰文：中國科學生物科學

編輯：circRNA

排版：Siuyee

研究背景

RNA種類繁多，在發育過程中及各種生理病理條件下都發揮著重要的生物學功能，然而由于缺乏穩定且高效的RNA在體調控技術導致我們對發育過程中RNA功能的理解較為匱乏，為了解決這一問題，亟需建立一個新的研究平臺。

近日，中國科學院分子細胞科學卓越創新中心陳玲玲研究員和李勁松院士在Science China Life Sciences在線發表了合作的最新研究成果“A CRISPR/RfxCas13d-mediated strategy for efficient RNA knockdown in mouse embryonic development”。文章將CRISPR-Cas13技術和類精子干細胞介導的半克隆技術結合，建立了在小鼠早期胚胎發育過程中穩定、高效且持續敲降不同種類RNA的新策略，為研究小鼠早期胚胎發育過程中特定RNA的功能提供了全新的研究手段。

在該研究中，研究人員通過CRIPSR-Cas9技術將CRISPR-RfxCas13d插入到小鼠安全的基因整合位點Rosa26和H11中，發現在Rosa26基因位點插入后CRISPR-RfxCas13d蛋白可以在多個組織廣泛且較高水平的表達，然后結合類精子干細胞介導的半克隆技術實現了在小鼠早期胚胎發育過程中對mRNA、lncRNA和circRNA的穩定高效的敲降，其中敲降mRNA-Sfmbt2在小鼠E11.0天會導致胚胎死亡；敲降lncRNA-Fendrr在小鼠E13.75天會導致胚胎露臍、水腫和心臟發育異常等情況；敲降circRNA-circMan1a2(2,3,4,5,6)會導致E13.5胚胎得率降低。此外文章還通過比較了一條gRNA和6條gRNA串聯，發現6條gRNA串聯具有更穩定更高效的敲降效果。

總之，該研究建立了一個在不影響遺傳信息的條件下在小鼠胚胎發育過程中穩定高效敲降不同種類RNA的新平臺，豐富了研究發育過程中RNA功能的新手段。

分子細胞卓越中心張麟博士和博士研究生曹詩夢為該文共同第一作者，陳玲玲研究員和李勁松院士為共同通訊作者。該工作得到了來自中國科學院、科技部、國家自然科學基金委和上海市科委的經費支持。

原文鏈接

https://doi.org/10.1007/s11427-023-2572-6